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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人直腸黏膜上皮細胞
產(chǎn)品簡介：
人直腸黏膜上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：KLRA1（Ly-49a）抗體 成纖維細胞生長因子17抗體 非霍奇金淋巴瘤蛋白抗體 人子宮肌瘤組織源細胞 人食管成纖維細胞 PL-21人急性髓細胞白血病細胞 MDA-MB-468 (人乳腺癌細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：207
更新時間：2024-10-31
產(chǎn)品特性Product characteristics
人直腸黏膜上皮細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
直腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7164 |
細胞簡介：
人直腸黏膜上皮分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以而終。直腸上端的大小似結(jié)腸，其下端擴大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，最下端變細接。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內(nèi)動脈的直腸中動脈和來自髂內(nèi)動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
方法簡介：
公司實驗室分離的人直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人直腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）試劑盒 96T/48T
小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒 96T/48T
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 96T/48T
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 人輕化1(HYD)試劑盒
Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDTELISAKit 人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanalpha-L-fucosidase,AFU試劑盒人αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物二(MDA)比色法定量試劑盒50次
MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體
高遷移率族蛋白2樣蛋白1抗體
ESAM重組小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein
補體1抑制因子(C1INH)重組蛋白 Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)
DCTPP1重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 Protein
DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白
PDGFRB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 蛋白
補體1抑制因子(C1INH)重組蛋白 Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)
DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白
ESAM重組小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein
PDGFRB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 蛋白
DCTPP1重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 Protein
人直腸黏膜上皮細胞大鼠脯酰羧肽酶(PRCP)試劑盒 ，英文名： PRCP ELISA Kit
Mouse niic oxide (NO) ELISA Kit 小鼠血清(NO)試劑盒
Ratalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGPI(Humanglucose-6-phosphateisomerase)ELISAKit人葡萄糖60酸異構(gòu)酶
細胞凋亡誘導(DNA合成抑制)試劑盒20次
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
